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山东林果害虫病毒研究初报

作者: 发布时间:2019-12-19 18:08:52 阅读: 74 次

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山东林果害虫病毒研究初报

 

摘要:20142016年在山东省的林果害虫中检测出十种病毒,分别是桃天蛾CPV、古毒蛾NPV、豆天蛾CPV、赤松毛虫NPV、侧柏松毛虫CPV、杨扇舟蛾CPV、杨尺蠖NPV、侧柏松毛虫NPV、双齿绿刺蛾NPV、灰斑古毒蛾NPV

关键词:林果害虫;核型多角体病毒;质型多角体病毒

 

前言:2014年至2016年在山东省省内危害林果的害虫中发现了多种病毒。经过鉴定分析,4种呼肠孤病毒科(Reouiridae)、质型多角体病毒(CPV)、呼肠孤病毒属(Reovius)。6种属杆状病毒(Bacuioviridae)、A亚组、核型多角体病毒(NPV)、杆状病毒属(Bacuiouirus)研究结果报道如下

1材料与方法

1.1害虫病毒样品

    桃天蛾(Marumba gaschkewitschii echephron)、古毒蛾(Orgyia antiqua Linnaeus)、豆天蛾(Cianis bilinccta tsingtauica Mell)、赤松毛虫(Dendrolimus spectailis Putler)、侧柏松毛虫(Dendrolimus suffuscus Lajonqyiere)、杨扇舟蛾(Clostera anachoreta Fabricius)、杨尺蠖(Apocheima cinerarius Erschoff)、双齿绿刺蛾(Parasa hilarata Staudinger)、灰斑古毒蛾(Orgyia ericae Germar

1.2方法

多角体的分离提纯,将感染病毒死亡的害虫研磨,使用孔径125微米的尼龙网过滤,接着使用低速离心方法去除可溶解的污染物,将内含体悬浮至百分之一的除垢剂溶液中,使用磨口玻璃均化器将其完全均质化,将多角体病毒彻底弄碎。悬浮液使用低速离心方法进行处理,同时在蒸馏水中收集多角体病毒。接着使用Biihler均化器以每分钟18000转对水悬浮液进行两分钟的质化,随后在离心机管内铺上一层4厘米厚、1.30比重的蔗糖溶液上。经过半个小时低速离心作用之后,多角体病毒已经在蔗糖溶液与水的离析处积累,而在蔗糖溶液中与离心机管底积累着较重的粒子,将多角体病毒从离心机管中取出,使用Biihler均化器进行均质化后,放在1.20比重的糖溶液上,在经过半个小时8000g的离心处理后,多角体病毒随之完全沉淀[1]

2结果与讨论

2.1桃天蛾质型多角体病毒(Marumba gaschkewitschii echephron CPV

病死虫病毒在透射电镜以及扫描下,多角体呈现六边形,形状不整齐,稍小一些的接近于圆形,大小在0.5u1.05u之间,平均约为0.78u。病毒粒子球形二十面体,表面上有较为明显的管状凸起,大小约为58nm.

2.2古毒蛾核型多角体病毒(Orgyia antiqua NPV

成虫会因病毒的扩散而液化死亡,在透射电镜下观察,多角体多呈现出三角形,一小部分则呈现为不规则形,大小在1.21.8u,平均为1.5u。病毒粒子的一段或两端有着短杆状的凸出体,属于单粒包埋体。

2.3豆天蛾质型多角体病毒(Cianis bilinccta tsingtauica CPV

成虫会因病毒萎缩至死亡,在扫描电镜下,多角体多呈现六边形,大小各异,小的接近与圆形,大小0.6u1.75u,平均1.2u。病毒粒子接近于球形二十面体,表面有较为明显的管状凸起,大小约为55nm

2.4赤松毛虫核型多角体病毒(Dendrolimus spectailis NPV

经过对感染病毒的赤松毛虫幼虫进行饲养,一个星期后幼虫由暗红色变为深褐色并呈字母A”形状死亡,轻触幼虫尸体,会流出乳黄色的脓液。在扫描电镜下观察,多角体多呈现为三角形,少许部分呈现四角形,表面上有轻微褶皱,直径0.75u1.80u,平均约为1.30u。病毒在经过弱碱处理之后会释放出病毒粒子与病毒束,病毒粒子大小平均约为320乘以82nm。而病毒束的两端呈现出钝圆形,大小平均约为330乘以120nm,病毒束每束内包含17个核衣壳,通常约为24个,为混合包埋型[2]

2.5侧柏松毛虫核型多角体病毒(Dendrolimus suffuscus NPV

通过采集发现,侧柏松毛虫幼虫会因病毒扩散由暗红色变为灰色或黑色倒挂死亡,通过透射电镜观察,多角体多呈现三角形与四角形,大小1.15u2.25u,平均1.70u。经过弱碱处理后会释放出大量的病毒粒子和病毒束,病毒粒子大约为332乘以86nm。病毒束大小约为359乘以144nm。在囊膜内包含15个核衣壳,通常约为24个,属于混合包埋形。

2.6杨扇舟蛾质型多角体病毒(Clostera anachoreta CPV

通过透射电镜观察,多角体多呈现为六角形,大小不一,较小的接近于圆形,大小0.60u1.92u,平均约为1.30u。经过超薄切片处理后,可以发现病毒粒子呈现球形二十面体,其表面上有较为明显的6个管状凸起,大小约为52nm

2.7杨尺蠖核型多角体病毒(Apocheima cinerarius NPV

通过透射电镜下观察,多角体呈现为三角形,极少部分呈现近圆形,表面光滑,大小0.85u1.75u,平均约为1.30u,病毒粒子呈现杆状,一端或两端有凸起现象,其大小平均约为300乘以88nm,属于单粒包埋型。

2.8双齿绿翅蛾核型多角体病毒(Parasa hilarata NPV

在透射电镜下观察,多角体呈现为四角形或三角形,大小1.15u1.90u,平均约为1.5u。病毒粒子呈现束状形态,个别也有单体存在,病毒束内含有核衣壳19个,通常约为24个,病毒束大小平均约为328乘以116nm,属于混合包埋型[3]

2.9灰斑古毒蛾核型多角体病毒(Orgyia ericae NPV

通过扫描电镜下观察,多角体多呈现为六角形,少部分四角形,表面有明显的较多的褶皱,大小0.61.45u,平均1.03u。病毒粒子呈杆状,在顶端有一处帽状物,平均大小约为343乘以75nm。属于单粒包埋型。

结语:我国在1989年的首届全国昆虫病毒学术会议统计,在农林方面的害虫上发现290多种病毒,在这几十年里,更多的病毒被不断发现,研究。在上述的几种病毒中,在我国仅有少量报导,在山东省省内属于首例。

参考文献

[1]严芝学,戴美学,李世国,孙京田,谢英勃,王书运.山东林果害虫病毒研究初报[N].山东师大学报(自然科学版),2013,04:53-59.

[2]陈廷伟,徐玲玫,陈婉华,黄源益.山东省几种林果害虫病毒记述[J].昆虫学报,2015,04:443-444+456.

[3]于洪春,孙艺峰,侯月敏,杜鹃,单金琼.甘蓝夜蛾核型多角体病毒对主要夜蛾科害虫生物活性的测定[N].东北农业大学学报,2013,13:1-7.